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产品介绍

Cell Counting Kit-8简称CCK8（或WST-8）试剂盒，是一种基于WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）显色反应的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

WST-8是MTT的一种升级替代产品，和MTT或MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的甲臜不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8、XTT和MTS产生的甲臜都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤，WST-8产生的甲臜比XTT和MTS产生的甲臜更易溶解，WST-8比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定，WST-8与MTT、XTT相比线性范围更宽，灵敏度更高。

WST-8在电子耦合试剂存在的条件下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物（formazan）。颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450 nm波长处测定OD值，间接反映活细胞数量。工作原理见图1。

应用范围

药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测

产品货号

C6005S/C6005M/C6005L/C6005XL

储运条件

4℃避光保存，长期储存置于-20℃，有效期见外包装；冰袋运输。

产品特点

线性好：我司产品在高细胞数量下和低细胞数量下都具有良好的线性；

毒性低：本产品对细胞造成很低的毒性，不会影响后续实验；

即用型：本产品开盖即用，无需做梯度稀释。

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。

2. 使用96孔进行细胞铺板，如果培养时间较长，一定要注意蒸发问题。建议采取弃用周围一圈的办法，改加相同量的PBS水或者培养液。

3. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。

4. 若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1 M的HCl溶液或者1% w/v SDS溶液，并将培养板在室温条件下避光保存。24 h内测定，吸光度不会发生变化。

5. 若细胞培养时间较长，培养基颜色发生变化或pH发生变化，建议更换新鲜的培养基后再加CCK-8试剂。含有酚红的培养基不影响本试剂盒做细胞活性的测定。

6. 如果样品为高浑浊度的细胞悬液，建议设定600 nm（或600 nm以上）作为参比波长，扣除参比波长的OD值即可。

7. CCK-8试剂对细胞的毒性非常低。它和活细胞内的脱氢酶持续反应使溶液颜色不断加深，OD值不断增加（注：活细胞内的脱氢酶是持续产生的），一般推荐的孵育时间是0.5~4 h。

8. 本产品仅限于科研，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

9. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。